Nova Ponte Trans-Sináptica: Caracterização funcional da interacção entre os recetores do tipo NMDA e a Neurexina-2

Visão Geral

Resumo do Projecto

A comunicação neuronal depende da localização precisa, quer dos recetores do lado pós-sináptico, quer da libertação de neurotransmissores do lado pré-sináptico. As proteínas de adesão celular desempenham um papel essencial na manutenção desta arquitetura, ao estabelecer ligações trans-sinápticas. Este projeto inovador tem como objetivo o estudo da interação entre dois importantes componentes sinápticos, a subunidade GluN2B dos recetores NMDA e a proteína de adesão celular pré-sináptica, Neurexina 2 (Nrxn2). Estas duas proteínas desempenham um papel fundamental no desenvolvimento neuronal e nos mecanismos de plasticidade sináptica, sendo por isso expectável que a sua interação desempenhe um papel muito importante na neurotransmissão e na formação de sinapses. Embora vários estudos se tenham debruçado sobre o estudo da função dos recetores NMDA e das Neurexinas, a possível interação entre as duas proteínas nunca foi explorada. Investigações anteriores sugeriram que as proteínas de adesão celular alteram a função dos recetores, no entanto a maior parte dos mecanismos moleculares envolvidos neste processo são ainda desconhecidos. O complexo molecular Nrxn2-GluN2B vai ser investigado utilizando um conjunto de tecnologias de ponta desde técnicas de bioquímica, microscopia de super-resolução e eletrofisiologia. Os domínios de interação entre a Nrxn2 e a subunidade GluN2B vão ser identificados e as consequências da interrupção desta ligação na fisiologia da sinapse e para o comportamento animal vão ser avaliadas.

Objectivos Principais

Os principais objectivos do projecto são: 1) caracterizar extensivamente o novo complexo de ligação NMDAR-Nrxn2, utilizando uma combinação de técnicas de bioquímica e microscopia molecular; 2) definir o papel fisiológico desta interacção, utilizando diferentes estratégias de substituição molecular ou de supressão da expressão das proteínas para avaliar o impacto na sua interação e nano-organização; 3) avaliar o efeito da perturbação da interacção Nrxn2-GluN2B-NMDARs na transmissão sináptica e no comportamento animal.

Detalhes de Projeto